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技術(shù)文章

如何改進(jìn)ELISA試劑盒試驗(yàn)中的錯(cuò)誤?

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      ELISA試劑盒有許多試驗(yàn)操作步驟,新手操作難免犯錯(cuò)。其中許多過(guò)錯(cuò)是由不充分的細(xì)節(jié)造成的。有很多方法可以減少這種過(guò)錯(cuò),比方在做試驗(yàn)時(shí)少說(shuō)話(huà),以防止唾液掉進(jìn)酶的標(biāo)簽中。當(dāng)然,我們也要學(xué)會(huì)探索自己的問(wèn)題,找出原因。那么,我們?cè)趺锤纳艵LISA試劑盒試驗(yàn)中的過(guò)錯(cuò)呢,下面我們來(lái)仔細(xì)說(shuō)說(shuō)。
  1、點(diǎn)評(píng)試劑的實(shí)用性
  試劑的穩(wěn)定性對(duì)準(zhǔn)確度非常重要。在啟用ELISA試劑盒之前,應(yīng)重復(fù)檢測(cè)陰性和陽(yáng)性對(duì)照品和樣品,試劑僅在試劑符合要求后才能運(yùn)用。
  2、操作前仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
  嚴(yán)格依照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作。不同批號(hào)的試劑不混合。值得改善的是,只有經(jīng)過(guò)重復(fù)的試驗(yàn),如洗盤(pán)的數(shù)量,才能加以改善。
  3、加樣要準(zhǔn)確、快速
  樣品添加的不準(zhǔn)確度和酶制劑用量的不確認(rèn)度直接影響顯色效果。此外,顯色深度和A值的確認(rèn)與顯色劑和終液體的參加量有關(guān),因而樣品的裝載應(yīng)謹(jǐn)慎。需要在一定時(shí)間內(nèi)完成采樣的試驗(yàn),假如采樣速度慢,會(huì)呈現(xiàn)差錯(cuò),試劑會(huì)露出很長(zhǎng)時(shí)間,特別是當(dāng)室溫過(guò)高時(shí),保質(zhì)期會(huì)縮短乃至失效。
  4、檢驗(yàn)技術(shù)人員應(yīng)具備試驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。
  檢測(cè)技術(shù)人員可以熟練操作試驗(yàn)儀器儀表,具有一定的總結(jié)和分析問(wèn)題的才能,能及時(shí)、妥善地處理ELISA試劑盒試驗(yàn)中呈現(xiàn)的意外狀況。
  5、洗刷要*
  洗版不*,酶偶聯(lián)物的布景顏色為假陽(yáng)性。此外,清潔劑應(yīng)該是新鮮的,可以隨時(shí)運(yùn)用。舊的洗刷劑會(huì)添加布景,也可能呈現(xiàn)假陽(yáng)性。
  6、嚴(yán)控ELISA試劑盒試驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間
  ELISA試劑盒反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),酶被滅活,反應(yīng)時(shí)間過(guò)短,酶與血清中的微生物抗原和抗體不能*結(jié)合,產(chǎn)物結(jié)構(gòu)松懈不穩(wěn)定,易清洗,易產(chǎn)生假陰性。
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